Пластина для подсчета колиформных бактерий

Плашка для подсчета количества колиформных бактерий 3М Petrifilm Coliform Count Plate (CC) – это готовая система для нанесения образца с культуральной средой, содержащей модифицированный питательный состав Violet Red Bile (VRB), растворимый в холодной воде гелеобразующий агент и тетразолиевый индикатор, облегчающий подсчет колоний. Плашки Petrifilm CC можно использовать для подсчета количества колиформных бактерий при производстве пищевых и молочных продуктов. Плашки 3М Petrifilm выпускаются на предприятии, сертифицированном в соответствии с ISO-9002. 

Плашки Petrifilm CC пригодны для подсчета как суммарных (способных расти при температуре от 30 до 37°C), так и термоустойчивых (фекальных; способных расти при температуре от 41 до 45°C) колиформных бактерий.

Руководства AOAC INTERNATIONAL и U.S. FDA Bacteriological Analytical Manual (BAM) определяют колиформные бактерии как грам-отрицательные палочки, продуцирующие кислоту и газ при ферментации лактозы. Колонии колиформных бактерий, растущие на плашках Petrifilm CC, выделяют кислоту, которая приводит к изменению окраски рН-индикатора и усиливает цвет геля; газ, скапливающийся вокруг красных колоний, указывает на наличие колиформных бактерий.

ISO определяет колиформные бактерии по их способности расти в специфичной для используемого метода селективной среде. Метод ISO 4832, оценивая количество колиформных бактерий методом подсчета колоний, определяет их как продуцентов кислоты при росте на агаре, содержащем VRB с лактозой (VRBL). На плашках Petrifilm CC эти кислотопродуцирующие колиформные бактерии проявляются в виде красных колоний, выделяющих или не выделяющих газ. По методике ISO 4831, согласно которой количество колиформных бактерий оценивается методом определения наиболее вероятного числа (MPN), колиформные бактерии выявляются по их способности расти и продуцировать газ из лактозы на селективном питательном бульоне. На плашках Petrifilm CC эти колиформные бактерии проявляются в виде красных колоний, ассоциированных с газом. AFNOR одобрил использование плашек Petrifilm CC для подсчета суммарных колиформных бактерий, сравнив этот метод с методиками ISO 4831 и 4832. AFNOR одобрил также использование плашек Petrifilm CC для подсчета термоустойчивых колиформных бактерий, сравнив этот метод с методикой NF V08-017 Общего руководства по подсчету термоустойчивых колиформных бактерий (General Guidance to Enumeration of Thermotolerant Coliforms).

Предосторожности
3М не предоставляет документации, подтверждающей возможность использования плашек Petrifilm CC в каких-либо отраслях, кроме пищевой и молочной промышленности. Например, 3М не имеет данных о возможности использования этих плашек для оценки качества воды, фармацевтических или косметических продуктов.

Плашки Petrifilm не тестировались на всех возможных пищевых продуктах, при всех процессах пищевого производства, по всем известным контрольным протоколам или со всеми существующими штаммами колиформных бактерий или других видов бактерий.

Одобрение метода частными или общественными организациями (например, AOAC INTERNATIONAL или AFNOR) не гарантирует пригодность плашек Petrifilm CC для каждого конкретного пищевого или молочного продукта или процесса их производства.

Ни одна культуральная среда не выявит каждый раз в точности такой же штамм и такое же количество бактерий конкретного штамма, как другая среда. Кроме того, на выявление и количество бактерий оказывают влияние такие внешние факторы, как метод получения образцов, протокол тестирования, время приготовления, способ обработки и вариабельность условий инкубации (например, вариабельность желаемой температуры, толерантность при этой температуре и различия в используемом оборудовании) могут влиять на выход бактерий и их количество. На результат может повлиять и сам пищевой образец. Например, продукты с высоким содержанием сахара могут увеличивать газообразующий потенциал неколиформных Enterobacteriaceaе.

Не используйте плашки Petrifilm CC в диагностических целях на людях или животных.

Как и при использовании любой культуральной среды, тестирование на плашках Petrifilm CC не дает гарантии качества продуктов или процессов, подвергающихся проверке.

За информацией о документации по эксплуатационным качествам продукта обращайтесь к местному представителю 3М Microbiology Products.

Ответственность пользователя
Только пользователь отвечает за то, чтобы на основании тестирования достаточного количества образцов конкретного пищевого продукта, зараженного соответствующими микроорганизмами, определить, отвечает ли выбранная тест-система требуемым критериям.

Пользователь отвечает также и за то, чтобы определить, отвечает ли выбранный метод тестирования требованиям его потребителей или поставщиков. Пользователь должен обучить свой персонал правильной технологии тестирования Необходимую информацию Вы найдете в материалах “Хорошей Лабораторной Практики” (Good Laboratory Practices – US Food and Drug Administration) или в ISO Guide 25.

Отказ от гарантии/ограниченное возмещение ущерба
За исключение случаев, оговоренных законом, компания 3М отказывается от любых явных и подразумеваемых гарантий, включая любые гарантии спроса на продукцию и ее пригодности для конкретных целей, но не ограничиваясь ими. Если будет доказано, что какая-либо из плашек Petrifilm CC оказалась дефектной, официальный дистрибьютор 3М  заменит ее или, по желанию потребителя, возместит ее стоимость. Это ваше исключительное право на возмещение ущерба. Вы обязаны соответствующим образом известить компанию 3М в течение 60 дней об обнаружении возможного дефекта продукта и вернуть его в 3М. Пожалуйста, позвоните в Службу потребителей (1-800-328-1671 в США) или вашему местному представителю 3М Microbiology Products для получения разрешения на возврат продукции (Return Goods Authorization).

Ограничение ответственности компании 3М
За исключение случаев, оговоренных законом, компания 3М не несет ответственности за какие-либо потери или убытки, прямые, косвенные, особые, случайные или опосредованные, включая отсутствие прибылей, но не ограничиваясь ими. За исключение случаев, оговоренных законом, ни при каких обстоятельствах ответственность 3М не будет превышать стоимость плашек, оказавшихся дефектными. Потребитель может иметь дополнительные права, по поводу которых он может проконсультироваться в стране, где производилась покупка.

Хранение и ликвидация
Храните невскрытые упаковки с плашками Petrifilm в холодильнике или морозильной камере при температуре <8°C (46°F). В зонах с высокой влажностью перед открытием доведите температуру упаковок до комнатной. Неиспользованные плашки поместите обратно в упаковку. Чтобы предотвратить контакт с влагой, не храните открытые упаковки в холодильнике. Храните вновь запечатанные упаковки в сухом прохладном месте в течение не более одного месяца. Нахождение плашек Petrifilm при температуре >25°C (77 °F) и/или относительной влажности >50% может повлиять на их эксплуатационные качества. Не используйте плашки, на которых заметно коричневое окрашивание. Срок годности и номер партии указаны на каждой упаковке плашек Petrifilm и на каждой плашке.

Как и все системы для тестирования микроорганизмов, плашки Petrifilm CC после использования могут содержать жизнеспособные бактерии, что может представлять потенциальную опасность. Следуйте современным стандартам инактивации и ликвидации.

Инструкция по использованию
Подготовка образцов
1. Используйте соответствующие стерильные разбавители: фосфатный буфер Butterfileld’a (IDF фосфатный буфер: 0,0425 г/л KH2PO4 c pH 7,2), 0,1% пептоновую воду, пептоновый солевой дилюент (метод ISO 6887), забуференную петоновую воду (метод ISO 6579), физиологический раствор (0,85 – 0,90%, вес/объем), не содержащий бисульфитов лецитиновый бульон и дистиллированную воду. Не используйте с плашками Petrifilm CC буферные растворы, содержащие цитрат, бисульфит или тиосульфат, т.к. эти соединения могут ингибировать рост бактерий. Если в методике рекомендован цитратный буфер, замените его подогретым (до 40 - 45 °C) фосфатным буфером Butterfileld’a.
2. Смешайте или гомогенизируйте образец.
3. Для оптимального роста или выхода бактерий доведите рН разведенного образца до 6,6 – 7,2. Для коррекции рН кислых образцов используйте 1 н. NaOH. pH щелочных образцов доведите с помощью 1 н. HCl.

Посев на плашки
1. Поместите плашки Petrifilm CC на ровную поверхность (см. рис. а).
2. Поднимите верхнюю пленку и распределите 1 мл образца или разведенного образца в центре нижней пленки (см. рис. b).
3. Вращательным движением опустите верхнюю пленку вниз на образец (см. рис. с).
4. Поместите пластиковый распределитель гладкой стороной вниз в центр плашки (см. рис. d). 
5. Мягко надавите на центр устройства, чтобы равномерно распределить образец. Распределите инокулят по всей зоне роста плашки Petrifilm прежде, чем начнет формироваться гель. Не перемещайте распределитель по плашке.
6.  Удалите распределитель и оставьте плашку в покое, по крайней мере, на одну минуту для отвердевания геля.

Инкубация
1. Инкубируйте плашки в горизонтальном положении или в штативе для плашек 3M PetrifilmTM, прозрачной стороной вверх, в стеллажах, состоящих не более чем из 20 плашек. Воздух в инкубаторе должен быть увлажненным. Потеря влаги с плашки (определяемая по потере веса) за время инкубации не должна превышать 15%.
2. В зависимости от референтных методов, используемых в данном регионе, можно использовать несколько различных временных и температурных режимов инкубации.
Например:
В соответствии с АОАСв Official MethodsSM (986.33 - Методы подсчета числа суммарных и колиформных бактерий в молоке на сухих регидратируемых пленках и 989.10 – Использование сухих регидратируемых пленок для подсчета числа колиформных и аэробных бактерий в молочных продуктах) следует инкубировать плашки Petrifilm CC в течение (24 ± 2) часов при (32 ± 1)°C.

В соответствии с АОАСв Official MethodsSM (991.14 - Подсчет колиформных бактерий и Escherichia coli в пищевых продуктах на сухих регидратируемых пленках) следует инкубировать плашки Petrifilm CC в течение (24 ± 2) часов при (35 ± 1)°C.

Методы, одобренные AFNOR
Подсчет суммарных колиформных бактерий в сравнении с ISO 4832 (3М-01/2 -09/89А) и ISO 4831 (3М-01/2 -09/89B).
Все пищевые продукты, кроме моллюсков.
- Инкубировать плашки Petrifilm CC в течение (24 ± 2) часов при (30 ± 1)°C, (35 ± 1)°C или (37 ± 1)°C.
- Как рекомендовано в ISO 4831 и ISO 4832, эти температуры должны быть согласованы заинтересованными сторонами и указаны в сертификате анализа.
Термоустойчивые колиформные бактерии: в сравнении с NF V08-017, среда VRBL при (44,5 ± 0,5)°C (3М-01/2 -09/89С)
Все пищевые продукты
- Инкубировать плашки Petrifilm CC в течение (24 ± 2) часов при (44 ± 1)°C.
Нордический комитет по анализу пищевых продуктов (Nordic Committee on Food Analysis – NMKL) – метод 147.1993
Инкубировать плашки Petrifilm CC в течение (24 ± 2) часов при 37°C.

Интерпретация
1. Количество колоний на плашках Petrifilm CC можно подсчитать на стандартном счетчике колоний или другом подсвечиваемом увеличителе. Не учитывайте колонии, появляющиеся в пенной перемычке, так как они не подвержены селективному влиянию среды. Не считайте артефактные пузырьки, которые могут присутствовать в геле.
2. Оценка колиформных колоний на плашках Petrifilm CC зависит от метода. Например:
Согласно официальным методикам АОАС колонии колиформных бактерий имеют красный цвет и тесно (на расстоянии, не превышающем диаметр одной колонии) ассоциированы с включениями газа (см. рис. е).
или
В соответствии с одобренным AFNOR методом ISO 4831 (метод MPN), колонии колиформных бактерий окрашены в красный цвет и тесно (на расстоянии, не превышающем диаметр одной колонии) ассоциированы с включениями газа (см. рис. е). Примечание: при наличии большой доли не продуцирующих газ грам-отрицательных палочек может потребоваться дополнительное разведение для более точного подсчета колиформных бактерий в рекомендуемом диапазоне.
В соответствии с одобренными AFNOR методами ISO 4832 и NF V08-017 (метод VRBL), следует подсчитать все красные колонии, независимо от наличия в них газа.
3. Циркулярная зона роста имеет площадь примерно 20 см2. Расчет можно проводить на плашках, содержащих более 150 колоний, подсчитывая количество колоний в одном или более репрезентативных квадратах и определяя среднее количество колоний на квадрат. Умножив среднее количество колоний на 20, получают расчетное число колоний на плашке (см. рис. f).
4. Газ, выделяемый колиформными бактериями, может разрушить колонию так, что колония как бы «охватывает» пузырек. Такой вариант следует расценивать как единичную колиформную бактерию. 
5. Плашки Petrifilm CC, количество колоний на которых «слишком велико для подсчета» (TNTC), имеют одну из нижеследующих характеристик: много маленьких колоний, много пузырьков газа, углубление окраски геля из-за выделения кислоты. Если наблюдается одно из вышеописанных явлений, дополнительно разведите образец, чтобы получить более точный результат.
6. Колонии можно изолировать для дальнейшей идентификации. Поднимите верхнюю пленку и извлеките колонию из геля (см. рис.g). 
7. После окончания инкубации плашки можно хранить в замороженном виде в течение не более одной недели при температуре Ј-15C° (5F°) для последующего подсчета.

Дополнительную информацию Вы найдете в “Interpretation Guide”. Если у Вас есть вопросы об особенностях использования в различных случаях или о специфических технологиях, пожалуйста, свяжитесь с ближайшим представителем 3М Microbiology Products.

Объяснение символов
- Внимание, см. Инструкции по использованию
- Слово “LOT” в рамке и песочные часы – это символы номера партии и срока годности. После песочных часов следуют год и месяц окончания срока годности (год и месяц: 2000-10). Вся строчка после песочных часов является номером партии (2000-10 AZ).
- Хранить ниже указанной температуры.

  • Приглашаем Вас 6 июня на бесплатный семинар по терапевтической продукции 3М ESPE

    Приглашаем Вас 6 июня на бесплатный семинар по терапевтической продукции 3М ESPE. По окончании семинара будут выдаваться сертификаты. Более подробную информацию о времени и месте проведения семинара. (495)-938-70-72, 938-70-73, 938-72-78

    Читать дальше »

  • Тест-пластины УЖЕ 30 ЛЕТ Petrifilm®.Тест-пластины УЖЕ 30 ЛЕТ Petrifilm®.

    Читать дальше »

  • Стетоскоп Littmann® - подарок тем, кто дарит жизнь.Стетоскоп Littmann® - подарок тем, кто дарит жизнь.

    Высочайшее качество акустики стетоскопов Littmann® - прекрасный подарок для любого специалиста, а возможность персонализации подчеркнет Вашу индивидуальность.

    Читать дальше »